CHO 细胞高表达位点基因定点敲入试剂盒(产品号:KRK-01101-K)是一款用于CHO细胞蛋白表达稳转株构建的试剂盒。其原理为使用 CRISPR/Cas9 介导的基因定点整合技术,将外源基因定点插入到 CHO 细胞的潜在的转录活跃区,提高外源基因的高效、稳定表达。
产品名 | 货号 | 规格 | 有效期 | 储存条件 |
CHO-sgRNA 质粒 | KRK-01101 | 50ug | 12 个月 | -20℃保存 |
KRK-01102 | 50ug | 12 个月 | -20℃保存 | |
CHO-GOI-Donor 质粒 | KRK-01103 | 50ug | 12 个月 | -20℃保存 |
CHO-L-Primer-F (10uM) | KRK-01105-1 | 50uL | 12 个月 | -20℃保存 |
CHO-L-Primer-R (10uM) | KRK-01105-2 | 50uL | 12 个月 | -20℃保存 |
CHO-R-Primer-F (10uM) | KRK-01106-1 | 50uL | 12 个月 | -20℃保存 |
CHO-R-Primer-R (10uM) | KRK-01106-2 | 50uL | 12 个月 | -20℃保存 |
1. 定点整合,表达更稳定
基于 CRISPR/Cas9 定点敲入技术,将目的基因精准整合至 CHO 细胞高转录活跃区域,避免随机整合造成的表达波动,实现长期稳定高表达。
2. 双质粒瞬转,流程简化
采用双质粒瞬时转染策略,无需复杂病毒包装或多轮载体构建,仅通过电转即可完成基因导入,进行药筛获得细胞群,就可以直接进行单克隆细胞铺板。大幅降低实验门槛。
3. 周期显著缩短
最快约 6周获得单克隆细胞株,整体开发周期缩短至 1.5–2.5个月,相比传统随机筛选节省大量时间。
4. 无GFP设计,更贴近工业开发场景
去除荧光筛选模块,避免外源报告基因对后续表达稳定性及下游开发造成干扰,更适合抗体/重组蛋白生产工艺开发。
5. 蛋白活性保持完整
定点整合后的目的蛋白具备正常构象和生物学活性,可直接用于功能验证与候选分子筛选。
6. 配套检测体系完整
内置左右同源臂PCR引物,可快速完成单克隆阳性鉴定,提高筛选效率。
1. 化转效率
2. 电转效率
1. 细胞群表达水平示例
2. 单克隆表达水平示例
3. 单克隆细胞进行基因敲入鉴定(以CD28-FC-GFP定点敲入CHO-S细胞克隆为例)
4. 表达蛋白活性展示(以CD28抗体激活扩增T细胞为例)
五、产品优势
CHO定点敲入试剂盒提供了一种快速构建稳转细胞株的方法,缩短株构建时间、降低筛选工作量、可快速进入表达验证阶段,且降低随机整合位置效应,批次稳定性强,提高实验重复性、便于后续放大培养和工艺迁移;广泛适用于单抗表达细胞株开发、重组蛋白稳定表达、细胞株平台构建、工业级CHO宿主开发等领域。
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