CHO细胞高密度瞬时转染

    1.将处于对数生长期的CHOK1-Hi细胞离心重悬至20×10^6个/ml的密度，震

  荡培养1小时后从培养箱中取出进行转染；

    2.转染时直接添加质粒至细胞培养中（按终浓度17ug/ml计算），充分摇匀

  后，再添加转染试剂（TA-CHO）（添加量按终浓度35ug/ml计算），充分混匀

  后将其放回培养箱中进行培养；

    3.在培养箱中培养5小时后，以体积为2：1的比例（2份Hi- KDCHO，1份转染

  细胞悬液）用Hi-KDCHO培养液将转染后的细胞稀释后，放回培养箱中培养。

   1.转染24小时后加入细胞蛋白表达增强剂KE-CHO和营养补充剂KT-Feed，以

  增加产物表达量；

   2.待转染后的细胞生长至10×10^6个/ml时（一般为接种后的1~2天），需每

  天添加1g/L的葡萄糖，若细胞生长至20×10^6个/ml时（一般为接种后的4~6

  天），葡萄糖的添加量可加倍；

   3.转染后第5-7天测定产物表达量，客户可根据细胞状态及表达量选择适宜的收

  获时间。

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